核酸的定量是NanoDrop one超微量分光光度计使用频率很高的一个功能，可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同，定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。

    测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，然后测试空白液和样品液，但是实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者比较头痛的一个问题。

　　NanoDrop one超微量分光光度计允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和度。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。    样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值在0.1-1.。在此范围内，颗粒的干扰相对较小，结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低或者过高。

    后是操作因素，如混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值，混合液不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈，必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大。换算系数和样品浓度单位选择一致，不能采用窗口磨损的比色杯。